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Quarter
Q1, 2025
Applicant
Zoltan Ivics
Paper Title
A novel hyperactive variant of the Sleeping Beauty transposase facilitates non-viral genome engineering
The name(s) of the first, last or corresponding authors who are DG-GT members
Zoltan Ivics
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Date of the online publication
10 February 2025
Summary
Das Dornröschen-Transposon-System (SB) ist ein nützliches Werkzeug für genetische Anwendungen, einschließlich der Gentherapie. Wir entdeckten eine hyperaktive Variante der SB100X-Transposase, genannt SB200X. Diese Mutante, die aus einem spezifischen Aminosäureaustausch (Q124C) resultiert, zeigte eine ∼2-fache Zunahme der Transpositionsaktivität in verschiedenen menschlichen und murinen Zellen. Andere Aminosäureaustausche in Position 124 führten ebenfalls zu einem hyperaktiven Phänotyp. Position 124 befindet sich am äußersten Rand der Linker-Region, die die DNA-bindenden und katalytischen Domänen der Transposase verbindet. Im Einklang mit einer Rolle des Linkers in einem autoregulatorischen Mechanismus, der als Überproduktionshemmung (OPI) in der monophyletischen Gruppe der Mariner-Transposasen bezeichnet wird, zeigen wir, dass sich die Hyperaktivität von Q124C bei hohen Konzentrationen der Transposase manifestiert, was auf eine teilweise Resistenz von SB200X gegenüber OPI hindeutet.
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