[Frontiers in Immunology]
Sophia Schreiber, Lisa S. Dressler, Eva Loffredo-Verde, Theresa Asen, Stephanie Färber, Wenshi Wang, Tanja Groll, Anindita Chakraborty, Fenna Kolbe, Christoph Kreer, Anna D. Kosinska, Sylvain Simon, Stephan Urban, Florian Klein, Stanley R. Riddell and Ulrike Protzer
Der adoptive T-Zell-Transfer stellt ein aussichtsreiches Konzept für die Therapie der chronischen Hepatitis B und des assoziierten Leberkrebs dar. Der Einsatz von chimären Antigenrezeptoren (CARs) hat dabei den Vorteil, dass oberflächengebundene Antigene auf den Zielzellen MHC-unabhängig erkannt werden. Damit steht die therapeutische Anwendung einer breiten Patientengruppe zur Verfügung. In der vorliegenden Publikation stellen wir eine Methode zur schnellen und effizienten Generierung von hochspezifischen CARs vor. Mittels Einzelzellsortierung von B-Zellen aus Patienten mit ausgeheilter Hepatitis B wurden zwei neue, humane Antikörper, 4D06 und 4D08, kloniert. Die Effektivität der resultierenden CARs wurde in vitro und in vivo gezeigt. Trotz gleichem Design zeigten die CARs abhängig vom Binder Unterschiede in der tonischen Aktivierung von T-Zellen. Der 4D08-CAR zeigte dabei ein für den therapeutischen Einsatz überzeugendes Profil.
[Molecular Therapy]
Tobias Bexte, Lacramioara Botezatu, Csaba Miskey, Fenja Gierschek, Alina Moter, Philipp Wendel, Lisa Marie Reindl, Julia Campe, Jose Francisco Villena-Ossa, Veronika Gebel, Katja Stein, Toni Cathomen, Anjali Cremer, Winfried S Wels, Michael Hudecek, Zoltán Ivics, Evelyn Ullrich
Natürliche Killerzellen (NK-Zellen) zeigen in klinischen Studien hohe Sicherheit und vielversprechende Wirksamkeit. Sie können als „off-the-shelf“-Produkt von allogenen Spendern eingesetzt werden und die bisherige virale Expression von chimären Antigenrezeptoren (CARs) erhöht das anti-tumor Potenzial nochmals. Hier präsentieren wir einen innovativen, virusfreien Ansatz zur Herstellung von CARNK-Zellen mittels des nicht-viralen Sleeping Beauty (SB) Transposon/Transposase-Systems und Minicircle-Vektoren. Diese aus peripherem Blut gewonnenen SB-CAR-NKZellen zeigen eine stabile CAR-Expression und besonders eine häufigere Integration in „Genomic-Safe-Harbors“ im Vergleich zu dem lentiviralen Verfahren. Die SB-generierte CAR-NK-Zellen haben zudem eine höhere Zytotoxizität gegenüber nicht-transfizierten NK-Zellen, was sowohl in vitro gegen Leukämiezellen als auch in vivo in Xenograft- Mausmodellen bestätigt wurde. Das SB-Transposon-System bietet damit einen effizienten, sicheren und kostengünstigeren Ansatz zur Herstellung von CAR-NK-Zellen und ist für die klinische Anwendung über die Leukämie hinaus einsetzbar.
[Small]
Mina Yazdi, Jana Pöhmerer, Morteza Hasanzadeh Kafshgari, Johanna Seidl, Melina Grau, Miriam Höhn, Victoria Vetter, Cosima C Hoch, Barbara Wollenberg, Gabriele Multhoff, Ali Bashiri Dezfouli, Ernst Wagner
Die wirksame Unterdrückung krankheitsbezogener Genexpression erfordert einen sicheren und effizienten Transport therapeutischer Nukleinsäure in entsprechende Zielzellen. Lipid Nanopartikel (LNP) Technologie wurde bereits in Form von Patisiran erfolgreich für den Hepatozyten-spezifischen Transfer von siRNA eingesetzt. Der nichtvirale Nukleinsäuretransfer in andere Gewebe stellt hingegen eine große Herausforderung dar. Yazdi et al. entwickelten neue siRNA-LNP Formulierungen, indem sie das in Patisiran eingesetzte kationisierbare Lipid DLin-MC3-DMA gegen ein innovatives Lipoamino-Xenopeptid austauschten. Dadurch ergeben sich verbesserte Zellaufnahme, endosomale Freisetzung ins Zytoplasma und effizientes Gene-Silencing bei bemerkenswert niedriger siRNA Dosierung von 150 Picogramm. Bei systemischer Verabreichung zeigten die neuen LNPs optimales Gene-Silencing in sinusoidalen Endothelzellen der Leber (LSEC) sowie bei Kombination mit Integrin-Targeting im Tumorendothel.