Unsere Studie hat eine Strategie entwickelt, um die „Immunflucht“ heterogener Tumoren bei der Viro-Immuntherapie zu überwinden. Unser Ansatz war es, durch onkolytische Adenoviren zwei bispezifische T-Zell-„Engager“ (TCEs) oder einen trispezifischen TCE zu kodieren, um T-Zellen gegen zwei unterschiedliche Zielmoleküle auf Tumorzellen umzuleiten. Dazu untersuchten wir zunächst verschiedene bispezifische TCE-Formate gegen c-MET und EGFR, die im nächsten Schritt die Entwicklung eines neuen trispezifischen TCE ermöglichten. Für diesen zeigten wir eine doppelte Zielerkennung und Induktion von T-Zell-vermittelter Zytotoxizität bei c-MET- und EGFR-einzelpositive Zellen. Durch vergleichende Analyse verschiedener (Co-) Expressionsstrategien, entwickelten wir onkolytische Adenoviren, die bei effektiver Onkolyse zwei bispezifische TCEs oder einen trispezifischen TCE kodieren. In Co-Kulturen mit infizierten Tumorzellen zeigten wir eine spezifische T-Zell-Aktivierung und Zytotoxizität und damit das gewünschte „duale Targeting“. Zusammenfassend entwickelten wir neuartige bi- und trispezifische TCEs und etablierten deren Anwendung für eine doppelt-zielgerichtete Viro-Antikörper-Therapie.